Aicone Biochip

Первый в мире полностью количественный тест на антитела КОВИД-19 – Полные титры всех Ig классов/подклассов, IgG, IgA, IgM; IgG_1-4

Введение

Aicone Biochip – это многоантигеновый, многодоменный, полностью количественный серологический тест КОВИД-19.

Aicone Biochip позволяет определить целевые эпитопы, титры и Ig класс/подкласс (IgG, IgA, IgM; IgG_1-4) антител, вырабатываемых на всех стадиях инфекции КОВИД-19, начиная с первоначального воздействия, развития болезни, после восстановления или после вакцинации. Эти результаты позволят получить критическое представление о том, имеют ли люди высокие титры потенциально нейтрализующих антител против SARS-CoV-2, которые могут защитить их от реинфекции, или же необходима бустерная вакцинация.

До недавнего времени не существовало теста на антитела КОВИД-19, который мог бы дать количественный результат. Это изменилось. Тест биочипа Aicone Biochip основан на дифференциальном соотношении между Ig классом/подклассом по 4 антигенам SARS-CoV-2 для оценки стадии инфекции и иммунитета индивидуума. Это не имеет аналогов ни в одном другом тесте.

COV2 | RU | AICONE BIOCHIP – серологический тест КОВИД-19

Aicone Biochip – это лабораторный тест биочипов, в котором используется запатентованная Aicone технология складывания белков Aicone-Protein Array, обеспечивающая правильное складывание вирусных антигенов, сохраняя все конформационные и линейные участки связывания антител. Aicone-Protein Array, используемый крупными фармацевтическими и исследовательскими организациями для разработки вакцин и терапевтических средств, гарантирует, что тест выявляет больше истинных положительных результатов и меньше ложных отрицательных.

Перекрестная реакция между иммуногенными областями SARS-CoV-2 и другими коронавирусами может привести к завышению серораспространенности в данной популяции. Aicone Biochip предназначен для снижения перекрестной активности за счет нацеливания на несколько специфических областей SARS-CoV-2, что приводит к меньшему количеству ложноположительных результатов и более точному определению серопроцентности.

Линейка продуктов Aicone Biochip основана на биочипе. Все они содержат множество дополнительных вирусных антигенов. Они предназначены для исследований и клинических испытаний вакцинации. Подробности см. в Описании продукта.

Содержание может быть адаптировано в соответствии с индивидуальными требованиями для клинических испытаний вакцины или серо-привилегированных исследований.

ОСНОВНЫЕ ПРИМЕНЕНИЯ

Aicone Biochip можно использовать для клинических испытаний вакцин или исследований серораспространенности.

Профилирование антител к населению для исследования серопроцентности

Целевой эпитоп антител, вырабатываемых после инфицирования, демонстрирует значительный уровень разнообразия в популяции. Aicone Biochip обеспечивает более точное определение серопроцентности путем нацеливания на более чем 10 различных доменов белков SARS-CoV-2.

Определить защитное качество и количество вырабатываемых антител.

Некоторые индивиды вырабатывают антитела, нацеленные на места, которые нейтрализуют (защитные), в то время как другие производят ненейтрализующие антитела. Aicone Biochip может быть использован для идентификации лиц с высокими титрами потенциально нейтрализующих антител против SARS-CoV-2.

Возможность количественной оценки антиген-специфических ответных реакций индивидуумов при испытании вакцины

Как показано ниже, данные, полученные в ходе испытаний Aicone Biochip, позволяют сделать 3 основных вывода:
1. Существует большая разница в титрах антител у лиц, инфицированных атипичной SARS-CoV-2.
2. Существует высокая степень вариации реакции пациента на специфические антитела в различных доменах белков SARS-CoV-2.
3. Более широкий охват целевых эпитопов приводит к повышению чувствительности и специфичности

Aicone Biochip ПРОДУКТНЫЙ РЕЙОН

Описание продукта

39508H и 39508V имеют 24 массива на слайд, 39508R имеет 8 массивов на слайд.

Спецификация продукта

Biochip Layout

Контрольные зонды

положительный контроль

1. Cy3-BSA
2. Cy5-BSA
3. IgA (положительный контроль для определения общего количества иммуноглобулинов)
4. IgG (положительный контроль на IgG и полное обнаружение иммуноглобулинов)
5. IgM (положительный контроль на IgM и полное обнаружение иммуноглобулинов)

Отрицательный контроль

1. IgA (отрицательный контроль для обнаружения IgG и IgM)
2. IgG (отрицательный контроль для обнаружения IgM)
3. IgM (отрицательный контроль для обнаружения IgG)
4. Отрицательный контрольный зонд для определения общего количества иммуноглобулинов

Aicone Biochip АНТИГЕНЫ

Технические характеристики основных антигенов

Вестерн-блот анализ, показывающий успешную экспрессию белков CoV и гриппа с помощью Aicone-Protein Array:

ПРЕИМУЩЕСТВА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ AICONE-PROTEIN ARRAY

Aicone-Protein Array облегчает измерение антител при непревзойденной чувствительности и специфичности, что делает его значительно превосходящим другие платформы антител. Поскольку все белки в белковых массивах Aicone-Protein Array правильно сложены, для связывания с антителами доступны конформационные и неконформационные эпитопы. Так как 90% сайтов связывания антител являются конформационными по своей природе, если белок не является полноразмерным или неправильно сложенным, другие белковые массивы фактически приводят к потере связывания с этими конформационными эпитопами. Использование белковых массивов Aicone-Protein Array обеспечивает связывание антител не только с линейными, не конформационными эпитопами, но и с прерывистыми конформационными эпитопами.

Основным преимуществом массивов на основе Aicone-Protein Array является то, что иммобилизованный белок складывается в свою нативную конформацию благодаря слиянию BCCP и отсутствию физической очистки белка, что может повлиять на экспозицию эпитопа для распознавания.

*90% антител связываются с конформационными эпитопами, ссылки:

Barlow, D. J., Edwards, M. S., & Thornton, J. M. (1986). Continuous and discontinuous protein antigenic determinants. Nature, 322(6081), 747–748;
Van Regenmortel, M. H. V. (2006, May). Immunoinformatics may lead to a reappraisal of the nature of B cell epitopes and of the feasibility of synthetic peptide vaccines. Journal of Molecular Recognition, 19(3), 183–187.

ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛИ (TNF) α – 1 антиген

Интерфероны – Антиядерные антитела – Фактор некроза опухоли

Все белки, включая контрольные, изготовлены на одном и том же массиве в триплетном виде. Ниже приведен список белков на массиве Aicone COVID+ V2 :

Интерфероны (ИФН) (-α, -γ, -ω) – 4 антигена
Антинуклеарные антитела (АНА), связанные с антигенами – 4 антигена
Фактор некроза опухоли (TNF) α – 1 антиген
SARS-CoV-2 Нуклеокапсидный антиген – 6 доменов
SARS-CoV-2 Спайк антиген – 3 домена, включая полную длину
Контроли (разведения Cy3-BSA, разведения IgG x 2, разведения IgA x 2, разведения IgM x 2, разведения BCCP, полиспецифический идентификатор x 2) – 10 компонентов

IFN и TNF были добавлены в чип, чтобы действовать в качестве компонентов для прогнозирования течения болезни и ее результатов путем измерения прямого связывания антител. Кроме того, было показано, что повышение содержания TNF-α и IL-6 в сыворотке крови пациентов с КОВИД-19 является сильным предиктором тяжести заболевания и выживаемости. Полученная от чипа информация об этих цитокинах облегчит потенциальную стратегию смягчения последствий при лечении КОВИД-19.

Фактор некроза опухоли TNF-α – воспалительный цитокин, вырабатываемый клетками иммунной системы (макрофагами) во время острого воспаления. Основная роль этого цитокина заключается в подаче сигнала об “апоптозе”, означающем, что клетка должна быть уничтожена.

Антинуклеарные антитела – это аутоантитела, которые связываются с содержимым ядра клетки. У нормальных людей иммунная система вырабатывает антитела к чужеродным антигенам, но не к аутоантигенам человека.

ИФНγ, или интерферон II типа, является цитокином, который имеет решающее значение для врожденного и адаптивного иммунитета против вирусных, некоторых бактериальных и простейших инфекций. ИФНγ является важным активатором макрофагов и индуктором экспрессии основной молекулы комплекса гистосовместимости (МКГ) II класса. Аберрантная экспрессия ИФН-γ связана с рядом аутоиндуцирующих и аутоиммунных заболеваний.

ИФН и ТНФ были добавлены в чип в качестве компонентов для предсказания течения болезни и ее исхода у инфицированных КОВИД-19 путем измерения прямого связывания антител. Биочип способен количественно определить Иммунный ответ. Все белки, включая контрольные, изготовлены на одном и том же массиве в триплетном виде.

ТОЧНОСТЬ БЛАГОДАРЯ AICONE-PROTEIN ARRAY

Антигены КОВИД-19 компании AICONE правильно сложены, сохраняя все конформационные участки связывания антител.

Aicone Biochip – Использует Aicone-Protein Array единственная в мире технология правильного складывания белков.

Поскольку считается, что большинство антител распознают прерывистые эпитопы на своих целевых белках, очень важно, чтобы антигены, используемые в серологических анализах или представленные В-клеткам для разработки вакцины на основе антител, были в нативном виде.
Использование технологии Aicone-Protein Array для производства антигенов SARS-CoV-2 обеспечит правильное складывание этих антигенов, сохраняя все конформационные участки связывания антител.

Химия поверхности белковых массивов Aicone-Protein Array

Биотинилизированные протеины Aicone-Protein Array с BCCP-тегами иммобилизируются на специально изготовленную поверхность гидрогеля со стрептавидиновым покрытием.
Белки Aicone-Protein Array сохраняют свою сложенную структуру и функционируют так, как если бы они присутствовали в водной среде.
Белки ведут себя так, как будто они находятся в свободном растворе.

КОМПЕТИТИВНАЯ ДИНАМИКА И ТЕХНОЛОГИЯ USP

Исключительная последовательность

Белковые массивы, изготовленные по технологии Aicone-Protein Array, демонстрируют исключительную консистенцию, измеряемую коэффициентом вариации (CV%).

График показывает CV% внутрибелковых реплик на основе белкового массива (Immunome) Aicone-Protein Array по сравнению с белковым массивом (PX), не принадлежащим Aicone-Protein Array. Среднее значение CV% для иммунома составило 7,2%, в то время как CV% для белкового массива PX составило 37%.

Очень высокая Специфика

Правильное складывание белков на белковых массивах Aicone-Protein Array обеспечивает сохранение как непрерывных, так и прерывистых эпитопов, благодаря чему доступны все сайты связывания антител. Это приводит к тому, что массивы Aicone-Protein Array обладают очень высокой специфичностью и, следовательно, высоким соотношением сигнал/шум.

Высоковоспроизводимый

Массивы белков на основе Aicone-Protein Array используют множество положительных и отрицательных элементов управления для измерения воспроизводимости в пределах и между исследованиями и партиями.

График показывает почти идеальную корреляцию Пирсона выше 0,97 при сравнении уровней аутоантител в 6,524 белковых точках в двух различных партиях.

Пикомолярная чувствительность

Автоантитела на белковых массивах на основе Aicone-Protein Array могут быть обнаружены при очень высокой чувствительности, требуется всего 1 – 10 мкл сыворотки крови. Предел детектирования находится в диапазоне 10 пг/мл, с линейным динамическим диапазоном не менее 5 порядков.