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COV2 | FR | AICONE BIOCHIP - test COVID-19 de sérologie multi-antigène
COV2 | FR | AICONE BIOCHIP – test COVID-19 de sérologie multi-antigène
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Aicone Biochip

Premier test d’anticorps COVID-19 entièrement quantitatif au monde – Titres complets de toutes les classes/sous-classes d’Ig, IgG, IgA, IgM; IgG1-4

Introduction

Aicone Biochip est un test COVID-19 de sérologie multi-antigène, multi-domaine et entièrement quantitatif.

Aicone Biochip permet de déterminer les épitopes cibles, les titres et la classe/sous-classe d’Ig (IgG, IgA, IgM ; IgG1-4) des anticorps produits à tous les stades de l’infection par COVID-19, depuis l’exposition initiale, le développement de la maladie, la post-récupération ou la post-vaccination. Ces résultats permettront de déterminer si les individus possèdent des titres élevés d’anticorps potentiellement neutralisants contre le CoV-2 du SRAS qui pourraient les protéger contre une réinfection ou si une vaccination de rappel est nécessaire.

Jusqu’à récemment, il n’existait pas de test de détection des anticorps COVID-19 permettant d’obtenir un résultat quantitatif. Cela a changé. Le test sur biopuce Aicone Biochip est basé sur le rapport différentiel entre les classes/sous-classes d’Ig sur les 4 antigènes du CoV-2-SARS pour donner une estimation du stade d’infection et de l’immunité d’un individu. Aucun autre test n’est comparable à celui-ci.

Aicone Biochip est un test de biopuce en laboratoire qui utilise la technologie brevetée de pliage des protéines Aicone-Protein Array, garantissant que les antigènes viraux sont correctement pliés, préservant tous les sites de liaison des anticorps conformationnels et linéaires. Aicone-Protein Array, qui est utilisé par les principales entités pharmaceutiques et de recherche pour développer des vaccins et des thérapies, garantit que le test identifie plus de vrais positifs et moins de faux négatifs.

La réactivité croisée entre les régions immunogènes du SARS-CoV-2 et d’autres coronavirus peut conduire à une surestimation de la séroprévalence dans une population donnée. Aicone Biochip est conçu pour réduire la réactivité croisée en ciblant plusieurs domaines spécifiques du SARS-CoV-2, ce qui permet de réduire le nombre de faux positifs et de déterminer plus précisément la séroprévalence.

La gamme de produits Aicone Biochip est basée sur les biopuces. Ils intègrent tous de multiples antigènes viraux supplémentaires. Ils sont conçus pour la recherche et les essais cliniques de vaccination. Voir la description du produit pour plus de détails.

Le contenu peut être adapté en fonction des besoins individuels pour les essais cliniques de vaccins ou les études de recherche sur la séroprévalence.

PRINCIPALES APPLICATIONS

Aicone Biochip peut être utilisé pour des essais cliniques de vaccins ou des études de recherche sur la séroprévalence. 

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Profilage des anticorps de la population pour la recherche sur la séroprévalence

L’épitope cible des anticorps produits après l’infection présente un niveau de diversité important dans une population. Aicone Biochip permet une détermination plus précise de la séroprévalence en ciblant plus de 10 domaines différents des protéines du CoV-2 du SRAS.

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Déterminer la qualité et la quantité de protection des anticorps produits

Certains individus produisent des anticorps qui ciblent des endroits qui sont neutralisants (protecteurs), tandis que d’autres produisent des anticorps non neutralisants. Aicone Biochip peut être utilisé pour identifier les personnes qui ont des titres élevés d’anticorps potentiellement neutralisants contre le CoV-2 du SRAS.

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Permettre l’évaluation quantitative de la réponse spécifique à l’antigène par les individus lors des essais de vaccins

As shown below, data from Aicone Biochip tests enable 3 major conclusions to be inferred:
1. Les titres d’anticorps varient considérablement selon les personnes infectées par le CoV-2 du SRAS
2. Il existe un degré élevé de variation dans les réponses des anticorps spécifiques des patients aux différents domaines des protéines du CoV-2 du SRAS
3. Une couverture plus large des épitopes cibles entraîne une sensibilité et une spécificité accrues

Aicone Biochip GAMME DE PRODUITS

Description du produit

Les 39508H et 39508V ont 24 matrices par diapositive, le 39508R a 8 matrices par diapositive.

Spécification du produit

Biochip Layout

Sondes de contrôle

  • Contrôle positif
    1. Cy3-BSA
    2. Cy5-BSA
    3. IgA (contrôle positif pour la détection des immunoglobulines totales)
    4. IgG (contrôle positif pour la détection des IgG et des immunoglobulines totales)
    5. IgM (contrôle positif pour la détection des IgM et des immunoglobulines totales)
  • Contrôle négatif
    1. IgA (contrôle négatif pour la détection des IgG et des IgM)
    2. IgG (contrôle négatif pour la détection des IgM)
    3. IgM (contrôle négatif pour la détection des IgG)
    4. Sonde témoin négative pour la détection des immunoglobulines totales

Aicone Biochip ANTIGÈNES

Détails techniques des principaux antigènes

Analyses Western blot montrant une expression réussie des protéines CoV et Influenza à l’aide de Aicone-Protein Array :

AVANTAGES DE L’UTILISATION DE AICONE-PROTEIN ARRAY

Aicone-Protein Array facilite la mesure d’anticorps à une sensibilité et une spécificité inégalées, ce qui en fait une plateforme d’anticorps largement supérieure aux autres. Comme toutes les protéines des réseaux de protéines de Aicone-Protein Array sont correctement pliées, des épitopes conformationnels et non conformationnels sont disponibles pour se lier aux anticorps. Étant donné que 90 % des sites de liaison aux anticorps sont de nature conformationnelle, si la protéine n’est pas de pleine longueur ou n’est pas correctement pliée, les autres réseaux de protéines entraînent en fait la perte de la liaison à ces épitopes conformationnels. L’utilisation des réseaux protéiques de Aicone-Protein Array garantit la liaison des anticorps non seulement aux épitopes linéaires non conformationnels, mais aussi aux épitopes conformationnels discontinus.

Le principal avantage de la matrice basée sur Aicone-Protein Array est que la protéine immobilisée est repliée dans sa conformation native, en raison de la fusion BCCP et de l’absence de purification physique de la protéine qui peut affecter l’exposition de l’épitope pour la reconnaissance.

*90% des anticorps se lient à des épitopes conformationnels, références :

  1. Barlow, D. J., Edwards, M. S., & Thornton, J. M. (1986). Continuous and discontinuous protein antigenic determinants. Nature, 322(6081), 747–748;
  2. Van Regenmortel, M. H. V. (2006, May). Immunoinformatics may lead to a reappraisal of the nature of B cell epitopes and of the feasibility of synthetic peptide vaccines. Journal of Molecular Recognition, 19(3), 183–187.

FACTEUR DE NÉCROSE TUMORALE (TNF) α – 1 antigène

Interférons – Anticorps antinucléaires – Facteur de nécrose tumorale

Toutes les protéines, y compris les contrôles, sont fabriquées en triple exemplaire sur la même matrice. Voici la liste des protéines de la matrice COVID+ V2 de l’Aicone :

  1. Interférons (IFN) (-α, – γ, -ω) – 4 antigènes
  2. Antigènes liés aux anticorps antinucléaires (ANA) – 4 antigènes
  3. Facteur de nécrose tumorale (TNF) α – 1 antigène
  4. Antigène de la nucléocapside du SRAS-CoV-2 – 6 domaines
  5. Antigène du SRAS-CoV-2 Spike – 3 domaines dont la longueur totale
  6. Contrôles (Cy3-BSA, IgG x 2 dilutions, IgA x 2 dilutions, IgM x 2 dilutions, BCCP, identifiant polyspécifique x 2) – 10 composants

Les IFN et le TNF ont été ajoutés à la puce pour servir de composants permettant de prédire l’évolution et l’issue de la maladie par la mesure de la liaison directe des anticorps. En outre, l’élévation du TNF-α et de l’IL-6 dans le sérum des patients atteints de COVID-19 s’est révélée être un puissant prédicteur de la gravité de la maladie et de la survie. Les informations obtenues à partir de la puce sur ces cytokines faciliteront la stratégie d’atténuation potentielle dans la gestion de COVID-19.

Le facteur de nécrose tumorale TNF-α est une cytokine inflammatoire produite par les cellules du système immunitaire (macrophages) lors d’une inflammation aiguë. Le rôle principal de cette cytokine consiste à signaler l'”apoptose”, c’est-à-dire la nécessité de détruire la cellule.

Les anticorps antinucléaires sont des auto-anticorps qui se lient au contenu du noyau de la cellule. Chez les individus normaux, le système immunitaire produit des anticorps contre les antigènes étrangers mais pas contre les auto-antigènes humains.

IFNγ, ou interféron de type II, est une cytokine essentielle à l’immunité innée et adaptative contre les infections virales, certaines bactéries et protozoaires. IFNγ est un activateur important des macrophages et inducteur de l’expression des molécules du complexe majeur d’histocompatibilité (CMH) de classe II. L’expression aberrante de IFNγ est associée à un certain nombre de maladies auto-inflammatoires et auto-immunes.

Les IFN et le TNF ont été ajoutés à la puce pour servir de composants permettant de prédire l’évolution et l’issue de la maladie chez les personnes infectées par COVID-19 grâce à la mesure de la liaison directe des anticorps. La biopuce est capable de quantifier la réponse immunitaire. Toutes les protéines, y compris les contrôles, sont fabriquées en triple exemplaire sur la même matrice.

PRÉCISION GRÂCE À AICONE-PROTEIN ARRAY

AICONE COVID-19 antigens are correctly folded, preserving all conformational antibody binding sites.

Aicone Biochip Exploite Aicone-Protein Array La seule technologie de protéines correctement pliées au monde

  • Comme on pense que la plupart des anticorps reconnaissent des épitopes discontinus sur leurs protéines cibles, il est essentiel que les antigènes utilisés dans les tests sérologiques ou présentés aux cellules B pour le développement de vaccins à base d’anticorps soient sous une forme nativement repliée.
  • L’utilisation de la technologie Aicone-Protein Array pour la production des antigènes du SRAS-CoV-2 permettra de s’assurer que ces antigènes sont correctement pliés, en préservant tous les sites de liaison des anticorps conformationnels.

Chimie de surface de Aicone-Protein Array

  • Les protéines Aicone-Protein Array biotinylées et marquées au BCCP sont immobilisées sur une surface d’hydrogel revêtue de streptavidine personnalisée.
  • Aicone-Protein Array Les protéines conservent leur structure repliée et fonctionnent comme si elles étaient présentes dans un environnement aqueux.
  • Les protéines se comportent comme si elles étaient en solution libre.

DYNAMIQUE CONCURRENTIELLE ET USP TECHNOLOGIQUE

Une cohérence exceptionnelle

Les puces à protéines réalisées avec la technologie Aicone-Protein Array présentent une consistance exceptionnelle, mesurée par le pourcentage de coefficient de variation (CV%).

Le graphique montre le CV% des réplicats intra-protéiques exécutés sur une matrice de protéines basée sur Aicone-Protein Array (Immunome) par rapport à une matrice de protéines non Aicone-Protein Array(PX). Le CV% moyen pour l’Immunome était de 7,2% alors que le CV% pour le protein array PX était de 37%.

Très grande spécificité

Le pliage correct des protéines sur les réseaux de protéines de Aicone-Protein Array garantit que les épitopes continus et discontinus sont préservés, d’où la disponibilité de tous les sites de liaison des anticorps. Cela permet aux puces Aicone-Protein Array d’avoir une très grande spécificité et, par extension, un rapport signal/bruit élevé.

Hautement reproductible

Les puces à protéines basées sur Aicone-Protein Array utilisent de multiples contrôles positifs et négatifs pour mesurer la reproductibilité au sein des études et des lots, et entre eux.

Le graphique montre une corrélation de Pearson presque parfaite, supérieure à 0,97, lorsque l’on compare les niveaux d’auto-anticorps sur 6 524 points de données de protéines dans deux lots différents.

Sensibilité picomolaire

Les auto-anticorps sur les réseaux de protéines basés sur Aicone-Protein Array peuvent être détectés à très haute sensibilité, seuls 1 à 10 µl de sérum sont nécessaires. La limite de détection est de l’ordre de 10 pg/ml, avec une gamme dynamique linéaire d’au moins 5 ordres de grandeur.