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COV2 | ES | AICONE BIOCHIP - COVID-19 es una prueba serológica
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Aicone Biochip

La primera prueba de anticuerpos COVID-19 totalmente cuantitativa – Títulos completos de todas las clases y subclases de Ig, IgG, IgA, IgM; IgG1-4

Introducción

Aicone Biochip COVID+ es una prueba serológica multiantígeno, multidominio y totalmente cuantitativa.

Aicone Biochip permite la determinación de los epítopos objetivo, los títres y la Ig clase/subclase (IgG, IgA, IgM; IgG1-4) de los anticuerpos producidos en todas las etapas de la infección por COVID-19, desde la exposición inicial, el desarrollo de la enfermedad, la recuperación posterior o la posvacunación. Estos resultados proporcionarán conocimientos críticos sobre si los individuos tienen títres altos de anticuerpos potencialmente neutralizantes contra el SARS CoV-2 que puedan proteger contra la reinfección o si se requieren vacunas de refuerzo.

Hasta hace poco no había ninguna prueba de anticuerpos COVID-19 disponible para proporcionar un resultado cuantitativo. Eso ha cambiado. La prueba del biochip Aicone Biochip se basa en la relación diferencial entre IgM e IgG a través de los 4 antígenos del SARS-COV-2 para dar una estimación del estado de infección e inmunidad de un individuo. Esto no tiene comparación con ninguna otra prueba.

Aicone Biochip es una prueba de biochip en laboratorio que utiliza la tecnología patentada de Aicone-Protein Array de plegado de proteínas que asegura que los antígenos virales se plieguen correctamente, preservando todos los sitios de unión de anticuerpos conformacionales y lineales. Aicone-Protein Array, que utilizan las principales entidades farmacéuticas y de investigación para desarrollar vacunas y productos terapéuticos, garantiza que la prueba identifique más verdaderos positivos y menos falsos negativos.

La reactividad cruzada entre las regiones inmunógenas del SARS-CoV-2 y otros coronavirus puede dar lugar a una sobreestimación de la sero-prevalencia en una población determinada. Aicone Biochip tiene por objeto reducir la reactividad cruzada al centrarse en múltiples dominios específicos del SARS-CoV-2, lo que da lugar a menos falsos positivos y a una determinación más precisa de la sero-prevalencia.

La gama de productos de Aicone Biochip está basada en el biochip. Todos ellos incorporan múltiples antígenos virales adicionales. Están diseñados para la investigación y los ensayos clínicos de vacunación. Vea la descripción del producto para más detalles.

El contenido puede personalizarse en función de las necesidades individuales de los ensayos clínicos de vacunas o de los estudios de investigación de sero-prevalencia.

APLICACIONES CLAVE

Aicone Biochip puede utilizarse para ensayos clínicos de vacunas o estudios de investigación de seroprevalencia.

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El perfil de anticuerpos de la población para la investigación de la seroprevalencia

El epítopo diana de los anticuerpos producidos tras la infección presenta un nivel de diversidad significativo en toda la población. Aicone Biochip proporciona una determinación más precisa de la seroprevalencia al dirigirse a más de 10 dominios diferentes de las proteínas del SARS-CoV-2.

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Determinar la calidad y cantidad de protección de los anticuerpos producidos

Algunos individuos producen anticuerpos que apuntan a lugares que son neutralizantes (protectores), mientras que otros producen anticuerpos no neutralizantes. Aicone Biochip puede utilizarse para identificar a los individuos que tienen títulos altos de anticuerpos potencialmente.

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Permitir la evaluación cuantitativa de la respuesta específica al antígeno por parte de los individuos en los ensayos de vacunas

Como se muestra a continuación, los datos de las pruebas de Aicone Biochip permiten deducir tres conclusiones principales:
1. Hay una amplia variación en los títulos de anticuerpos entre los individuos infectados por el SARS-CoV-2
2. Hay un alto grado de variación en las respuestas de los anticuerpos específicos del paciente a los diferentes dominios de las proteínas del SARS-CoV-2
3. Una cobertura más amplia de los epítopos objetivo conduce a una mayor sensibilidad y especificidad

Aicone Biochip GAMA DE PRODUCTO

Descripción del Producto

39508H y 39508V tienen 24 matrices por diapositiva, 39508R tiene 8 matrices por diapositiva.

Especificación del Producto

Biochip Layout

Sondas de control

  • Control positivo
    1. Cy3-BSA
    2. Cy5-BSA
    3. IgA (control positivo para la detección de inmunoglobulinas totales)
    4. IgG (control positivo para la detección de IgG e inmunoglobulinas totales)
    5. IgM (control positivo para la detección de IgM e inmunoglobulinas totales)
  • Control negativo
    1. IgA (control negativo para la detección de IgG e IgM)
    2. IgG (control negativo para la detección de IgM)
    3. IgM (control negativo para la detección de IgG)
    4. Sonda de control negativo para la detección de inmunoglobulinas totales

Aicone Biochip ANTIGENAS

Detalles técnicos de los principales antígenos

Análisis de Western blot que muestran una expresión satisfactoria de las proteínas del CoV y de la gripe utilizando Aicone-Protein Array:

VENTAJAS DE USAR AICONE-PROTEIN ARRAY

El Aicone-Protein Array mide los auto-anticuerpos con una sensibilidad y especificidad sin igual, lo que lo hace muy superior a otras plataformas de auto-anticuerpos. Debido a que todas las proteínas de los conjuntos de proteínas de Aicone-Protein Array están correctamente plegadas, se dispone de epítopos tanto conformacionales como non-conformacionales para unirse a los anticuerpos. Dado que el 90% de los sitios de unión a los anticuerpos son de naturaleza conformacional, si la proteína no es de longitud completa o no está plegada correctamente, otros arreglos de proteínas en realidad conducen a la pérdida de unión a estos epítopos conformacionales. Usando nuestro Aicone-Protein Array arrays de proteínas aseguramos la unión de los anticuerpos no sólo a los epítopos lineales no conformacionales sino también a los epítopos conformacionales discontinuos.

La principal ventaja del array basado en Aicone-Protein Array es que la proteína inmovilizada se pliega en su conformación nativa, debido a la fusión del BCCP y a la ausencia de purificación física de la proteína que puede afectar a la exposición del epítopo para su reconocimiento. 

La principal ventaja del array basado en Aicone-Protein Array es que la proteína inmovilizada se pliega en su conformación nativa, debido a la fusión del BCCP y a la ausencia de purificación física de la proteína que puede afectar a la exposición del epítopo para su reconocimiento.

*El 90% de los anticuerpos se unen a epítopos conformacionales, referencias:

  1. Barlow, D. J., Edwards, M. S., & Thornton, J. M. (1986). Continuous and discontinuous protein antigenic determinants. Nature, 322(6081), 747–748;
  2. Van Regenmortel, M. H. V. (2006, May). Immunoinformatics may lead to a reappraisal of the nature of B cell epitopes and of the feasibility of synthetic peptide vaccines. Journal of Molecular Recognition, 19(3), 183–187.

FACTOR DE NECROSIS TUMORAL (TNF) α – 1 antígeno

Interferones – Anticuerpos antinucleares – Factor de necrosis tumoral

Todas las proteínas, incluyendo las de control, se fabrican en la misma matriz por triplicado. A continuación se muestra la lista de proteínas en la matriz de Aicone COVID+ V2:

  1. Interferones (IFN) (-α, – γ, -ω) – 4 antígenos
  2. Antígenos relacionados con los anticuerpos antinucleares (ANA) – 4 antígenos
  3. Factor de Necrosis Tumoral (TNF) α – 1 antígeno
  4. Antígeno de la nucleocápside SARS-CoV-2 – 6 dominios
  5. SARS-CoV-2 Antígeno de pico – 3 dominios incluyendo la longitud completa
  6. Controles (Cy3-BSA, diluciones IgG x 2, diluciones IgA x 2, diluciones IgM x 2, BCCP, identificador poliespecífico x 2) – 10 componentes

Se añadieron IFN y TNF al chip para que actuaran como componentes para predecir el curso y el resultado de la enfermedad a través de la medición de la unión directa de los anticuerpos. Además de eso, la elevación del TNF-α y la IL-6 en el suero de los pacientes de COVID-19 ha demostrado ser un fuerte predictor de la gravedad de la enfermedad y la supervivencia. La información obtenida del chip de estas citoquinas facilitará una posible estrategia de mitigación en el manejo de COVID-19.

El factor de necrosis tumoral TNF-α es una citoquina inflamatoria producida por las células del sistema inmunitario (macrófagos) durante una inflamación aguda. La función principal de esta citoquina es la señalización de la “apoptosis”, lo que significa que la célula debe ser destruida.

Los anticuerpos antinucleares son autoanticuerpos que se unen al contenido del núcleo celular. En los individuos normales, el sistema inmunitario produce anticuerpos contra antígenos extraños, pero no contra autoantígenos humanos.

El IFNγ, o interferón de tipo II, es una citocina fundamental para la inmunidad innata y adaptativa contra las infecciones víricas, algunas bacterianas y protozoarias. El IFNγ es un importante activador de los macrófagos e inductor de la expresión de moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase II. La expresión aberrante de IFNγ se asocia a una serie de enfermedades autoinflamatorias y autoinmunes.

Los IFN y el TNF se añadieron al chip para que actuaran como componentes para predecir el curso de la enfermedad y el resultado en personas infectadas por COVID-19 mediante la medición de la unión directa de anticuerpos. El Biochip es capaz de cuantificar la Respuesta Inmune. Todas las proteínas, incluidos los controles, se fabrican en la misma matriz por triplicado.

PRECISIÓN DEBIDO A AICONE-PROTEIN ARRAY

Los antígenos COVID-19 de AICONE están correctamente plegados, preservando todos los sitios de unión de los anticuerpos conformacionales.

Aicone Biochip aprovecha Aicone-Protein Array la única tecnología de proteínas correctamente plegadas del mundo

  • Dado que se cree que la mayoría de los anticuerpos reconocen epítopos discontinuos en sus proteínas diana, es fundamental que los antígenos utilizados en los ensayos serológicos o presentados a las células B para el desarrollo de vacunas basadas en anticuerpos estén en una forma doblada nativamente.
  • El uso de la tecnología de Aicone-Protein Array para la producción de los antígenos del SARS-COV-2 asegurará que estos antígenos se plieguen correctamente, preservando todos los sitios de unión de los anticuerpos conformacionales. Aicone Biochip aprovecha Aicone-Protein Array la única tecnología de proteínas correctamente plegadas del mundo.

Química de la superficie de los conjuntos de proteínas Aicone-Protein Array

  • Las proteínas etiquetadas con BCCP y biotiniladas Aicone-Protein Array se inmovilizan en una superficie de hidrogel recubierta estreptavidina.
  • Aicone-Protein Array las proteínas conservan su estructura plegada y funcionan como si estuvieran presentes en un entorno de “agua”.
  • Las proteínas se comportan como si estuvieran en una solución libre.

DINÁMICA COMPETITIVA Y TECNOLOGÍA USP

Consistencia excepcional

Las matrices de proteínas hechas con la tecnología Aicone-Protein Array muestran una consistencia excepcional, medida por el porcentaje del coeficiente de variación (CV%).

El gráfico muestra el CV% de las replicas intra-proteicas ejecutadas en un array de proteínas basado en Aicone-Protein Array (Immunome) comparado con un array de proteínas no basadas en Aicone-Protein Array (PX). La media del CV% para el Immunome fue del 7,2%, mientras que el CV% para el conjunto de proteínas PX fue del 37%.

Especificidad muy alta

El correcto plegado de las proteínas en los conjuntos de proteínas Aicone-Protein Array asegura que se conserven tanto los epítopos continuos como los discontinuos, por lo que todos los sitios de unión de anticuerpos están disponibles. Esto lleva a que los arrays de Aicone-Protein Array tengan una especificidad muy alta, y por extensión, una alta relación señal-ruido.

Altamente reproducible

Los arreglos de proteínas basados en Aicone-Protein Array utilizan múltiples controles positivos y negativos para medir la reproducibilidad dentro y a través de los estudios y lotes.

El gráfico muestra una correlación de Pearson casi perfecta de más de 0,97 cuando se comparan los niveles de auto-anticuerpos a través de 6.524 puntos de datos de proteínas en dos lotes diferentes.

Sensibilidad picomolar

Los anticuerpos en Aicone-Protein Array basados en arrays de proteínas pueden ser detectados con una sensibilidad muy alta, sólo se requiere de 1 a 10 µl de suero. El límite de detección está en el rango de 10 pg/ml, con un rango dinámico lineal de al menos 5 órdenes de magnitud.