Aicone Biochip
Weltweit erster vollständig quantitativer COVID-19-Antikörpertest – Quantitative Antikörperspiegel aller Ig-Klassen/Unterklassen, IgG, IgA, IgM; IgG1-4
Einführung
Aicone Biochip ist ein vollständig quantitativer serologischer COVID-19-Test mit mehreren Antigenen und mehreren Domänen.
Aicone Biochip ermöglicht die Bestimmung der Zielepitope, Titer und Ig-Klassen/Unterklassen (IgG, IgA, IgM; IgG1-4) von Antikörpern, die in allen Stadien einer COVID-19-Infektion produziert werden, von der Erstinfektion, über die Entwicklung der Krankheit bis hin zur Post-Recovery oder Post-Impfung. Diese Ergebnisse werden entscheidende Erkenntnisse darüber liefern, ob Personen hohe Titer potenziell neutralisierender Antikörper gegen SARS-CoV-2 aufweisen, die vor einer Reinfektion schützen können, oder ob Auffrischungsimpfungen erforderlich sind.
Bis vor kurzem gab es keinen COVID-19-Antikörpertest, der ein quantitatives Ergebnis liefern konnte. Das hat sich geändert. Der Aicone Biochip Biochip-Test basiert auf dem Differenzverhältnis zwischen Ig-Klassen/Unterklassen über die 4 SARS-CoV-2-Antigene, um das Stadium der Infektion und Immunität einer Person abzuschätzen. Dies wird von keinem anderen Test erreicht.
Aicone Biochip ist ein laborgestützter Biochip-Test, bei dem die patentierte Aicone-Protein Array Proteinfaltungstechnologie von Aicone zum Einsatz kommt, die sicherstellt, dass die viralen Antigene korrekt gefaltet werden und alle konformativen und linearen Antikörperbindungsstellen erhalten bleiben. Aicone-Protein Array, das von großen Pharma- und Forschungsunternehmen zur Entwicklung von Impfstoffen und Therapeutika verwendet wird, stellt sicher, dass der Test mehr echte Positive und weniger falsche Negative identifiziert.
Die Kreuzreaktivität zwischen immunogenen Regionen von SARS-CoV-2 und anderen Coronaviren kann zu einer Überschätzung der Seroprävalenz in einer bestimmten Population führen. Aicone Biochip soll die Kreuzreaktivität verringern, indem es auf mehrere SARS-CoV-2-spezifische Domänen abzielt, was zu weniger falsch-positiven Ergebnissen und einer genaueren Bestimmung der Seroprävalenz führt.
Die Produktpalette von Aicone Biochip ist biochipbasiert. Sie alle enthalten mehrere zusätzliche virale Antigene. Sie sind für die Forschung und klinische Impfversuche konzipiert. Weitere Einzelheiten finden Sie in der Produktbeschreibung.
Der Inhalt kann auf der Grundlage der individuellen Anforderungen für klinische Impfstoffversuche oder Seroprävalenzforschungsstudien angepasst werden.
SCHLÜSSELANWENDUNGEN
Aicone Biochip kann für klinische Impfstoffversuche oder Seroprävalenzforschungsstudien genutzt werden.
Profilerstellung von Populationsantikörpern für die Seroprävalenzforschung
Das Zielepitop von Antikörpern, die nach einer Infektion produziert werden, weisen innerhalb einer Population eine signifikante Diversität auf. Aicone Biochip bietet eine genauere Bestimmung der Seroprävalenz, indem es auf über 10 verschiedene Domänen von SARS-CoV-2-Proteinen abzielt.
Bestimmen Sie die Schutzqualität und -quantität der produzierten Antikörper
Einige Personen produzieren Antikörper, die auf Stellen zielen, die neutralisierend (schützend) sind, während andere nicht neutralisierende Antikörper produzieren. Aicone Biochip kann verwendet werden, um Personen zu identifizieren, die hohe Titer von potenziell neutralisierenden Antikörpern gegen SARS-CoV-2 aufweisen.
Ermöglicht die quantitative Bewertung der antigenspezifischen Reaktion von Individuen in Impfstoffversuchen
Wie unten gezeigt, lassen sich aus den Daten der Tests von Aicone Biochip 3 wichtige Schlussfolgerungen ableiten:
1. Es gibt eine große Variation der Antikörpertiter bei SARS-CoV-2-Infizierten
2. Es gibt ein hohes Maß an Variation in den patientenspezifischen Antikörperreaktionen auf die verschiedenen Domänen der SARS-CoV-2-Proteine
3. Größere Abdeckung der Zielepitope führt zu erhöhter Sensitivität und Spezifität
Aicone Biochip PRODUKTBEREICH
Produktbeschreibung
39508H und 39508V haben 24 Arrays pro Objektträger, 39508R hat 8 Arrays pro Objektträger.
Produkt-Spezifikation
Biochip-Auslegung
Kontroll-Sonden
- Positive Kontrolle
-
- Cy3-BSA
- Cy5-BSA
- IgA (positive Kontrolle für den Nachweis von Gesamtimmunglobulinen)
- IgG (positive Kontrolle für den Nachweis von IgG und Gesamtimmunglobulinen)
- IgM (positive Kontrolle für den Nachweis von IgM und Gesamtimmunglobulinen)
- Negative Kontrolle
-
- IgA (Negativkontrolle zum Nachweis von IgG und IgM)
- IgG (Negativkontrolle für den IgM-Nachweis)
- IgM (Negativkontrolle für den IgG-Nachweis)
- Negativkontrollsonde zum Nachweis von Gesamtimmunglobulinen
Aicone Biochip ANTIGEN
Technische Details der Hauptantigene
Western-Blot-Analysen, die eine erfolgreiche Expression von CoV- und Influenza-Proteinen zeigen, unter Verwendung von Aicone-Protein Array:
VORTEILE DER NUTZUNG VON AICONE-PROTEIN ARRAY
Aicone-Protein Array ermöglicht Messungen von Antikörpern mit konkurrenzloser Sensitivität und Spezifität und ist damit anderen Antikörper-Plattformen weit überlegen. Da alle Proteine auf Aicone-Protein Array Protein-Arrays korrekt gefaltet sind, stehen sowohl lineare (kontinuierliche) als auch diskontinuierliche (Konformations-) Epitope für die Bindung an Antikörper zur Verfügung. Da 90% der Antikörper-Bindungsstellen diskontinuierlicher Natur sind, führen andere Protein-Arrays, wenn das Protein nicht in voller Länge oder nicht korrekt gefaltet ist, tatsächlich zum Verlust der Bindung an diese Konformationsepitope. Die Verwendung von Aicone-Protein Array Proteinarrays gewährleistet die Bindung von Antikörpern nicht nur an lineare, nicht konformationelle Epitope, sondern auch an diskontinuierliche Konformationsepitope.
Der Hauptvorteil des auf Aicone-Protein Array basierenden Arrays besteht darin, dass das immobilisierte Protein in seiner nativen Konformation gefaltet wird, was auf die BCCP-Fusion und das Fehlen einer physikalischen Proteinreinigung zurückzuführen ist, was die Exposition der Epitope für die Erkennung beeinträchtigen kann.
*90% der Antikörper binden an Konformationsepitope, Referenzen:
- Barlow, D. J., Edwards, M. S., & Thornton, J. M. (1986). Kontinuierliche und diskontinuierliche proteinantigene Determinanten. Natur, 322(6081), 747-748;
- Van Regenmortel, M. H. V. (2006, Mai). Die Immunoinformatik kann zu einer Neubewertung der Natur der B-Zell-Epitope und der Durchführbarkeit synthetischer Peptidimpfstoffe führen. Zeitschrift für molekulare Erkennung, 19(3), 183-187.
TUMOR-NEKROSE-FAKTOR (TNF) α – 1 Antigen
Interferone – Antinukleäre Antikörper – Tumor-Nekrose-Faktor
Alle Proteine, einschließlich der Kontrollen, werden auf demselben Array in dreifacher Ausführung hergestellt. Nachfolgend finden Sie die Liste der Proteine auf dem Aicone COVID+ V2 Array:
- Verdünnungen, IgM x 2 Verdünnungen, BCCP, polyspezifischer Identifikator x 2) – 10 Komponenten
- Interferone (IFN) (-α, – γ, -ω) – 4 Antigene Antinukleäre Antikörper (ANA) verwandte Antigene – 4 Antigene
- Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) α – 1 Antigen
- SARS-CoV-2 Nukleokapsid-Antigen – 6 Domänen
- SARS-CoV-2 Spike-Antigen – 3 Domänen einschließlich voller Länge
- Kontrollen (Cy3-BSA, IgG x 2 Verdünnungen, IgA x 2
IFNs und TNF wurden dem Chip als Komponenten hinzugefügt, um den Krankheitsverlauf und das Ergebnis durch die Messung der direkten Antikörperbindung vorherzusagen. Darüber hinaus hat sich die Erhöhung von TNF-α und IL-6 im Serum von COVID-19-Patienten als starker Prädiktor für den Schweregrad der Erkrankung und das Überleben erwiesen. Die aus dem Chip gewonnenen Informationen über diese Zytokine werden eine potenzielle Milderungsstrategie bei der Behandlung von COVID-19 erleichtern.
Tumor-Nekrose-Faktor TNF-α ist ein entzündliches Zytokin, das von den Zellen des Immunsystems (Makrophagen) während einer akuten Entzündung produziert wird. Die Hauptaufgabe dieses Zytokins ist die Signalisierung der “Apoptose”, was bedeutet, dass die Zelle zerstört werden muss.
Antinukleäre Antikörper sind Autoantikörper, die an Inhalte des Zellkerns binden. Bei normalen Menschen produziert das Immunsystem Antikörper gegen fremde Antigene, aber nicht gegen menschliche Autoantigene.
IFNγ, oder Typ-II-Interferon, ist ein Zytokin, das für die angeborene und adaptive Immunität gegen virale, einige bakterielle und protozoische Infektionen entscheidend ist. IFNγ ist ein wichtiger Aktivator von Makrophagen und Induktor der Expression von Molekülen des Haupthistokompatibilitätskomplexes (MHC) der Klasse II. Eine aberrante IFNγ-Expression wird mit einer Reihe von autoinflammatorischen und autoimmunen Erkrankungen in Verbindung gebracht.
IFNs und TNF wurden dem Chip hinzugefügt, um als Komponenten zur Vorhersage des Krankheitsverlaufs und -ausgangs bei COVID-19 infizierten Personen durch Messung der direkten Antikörperbindung zu dienen. Der Biochip ist in der Lage, die Immunantwort zu quantifizieren. Alle Proteine, einschließlich der Kontrollen, werden auf demselben Array in dreifacher Ausführung hergestellt.
GENAUIGKEIT DANK AICONE-PROTEIN ARRAY
Die COVID-19-Antigene von AICONE sind korrekt gefaltet, so dass alle konformationellen Antikörper-Bindungsstellen erhalten bleiben.
Aicone Biochip Leverages Aicone-Protein Array – Die weltweit einzige korrekt gefaltete Proteintechnologie
- Da die meisten Antikörpern dafür gedacht sind, dass sie diskontinuierliche Epitope auf ihren Zielproteinen erkennen, ist es entscheidend, dass Antigene, die in serologischen Tests verwendet oder B-Zellen für die antikörperbasierte Impfstoffentwicklung präsentiert werden, in nativ gefalteter Form vorliegen.
- Die Verwendung von Aicone-Protein Array Technologie für die Herstellung der SARS-CoV-2-Antigene stellt sicher, dass diese Antigene korrekt gefaltet sind und alle konformationellen Antikörper-Bindungsstellen erhalten bleiben.
Oberflächenbeschaffenheit der Aicone-Protein Array
- BCCP-markierte, biotinylierte Aicone-Protein Array Proteine werden auf einer maßgeschneiderten Streptavidin-beschichteten Hydrogeloberfläche immobilisiert.
- Aicone-Protein Array Proteine behalten ihre gefaltete Struktur bei und funktionieren so, als ob sie in einer wässrigen Umgebung vorhanden wären.
- Proteine verhalten sich, als befänden sie sich in freier Lösung.
WETTBEWERBSDYNAMIK UND TECHNOLOGIE USP
Außergewöhnliche Konsistenz
Protein-Arrays, die mit der Aicone-Protein Array Technologie hergestellt wurden, zeigen eine außergewöhnliche Konsistenz, gemessen am prozentualen Variationskoeffizienten (CV%).
Die Grafik zeigt den CV% der Intra-Protein-Replikate, die auf einem Aicone-Protein Array basierten Protein-Array (Immunom) laufen, im Vergleich zu einem nicht-Aicone-Protein Array (PX). Der mittlere CV% für das Immunom betrug 7,2%, während der CV% für den Proteinarray PX 37% betrug.
Sehr hohe Spezifität
Die korrekte Faltung der Proteine auf Aicone-Protein Array Protein-Arrays stellt sicher, dass sowohl kontinuierliche als auch diskontinuierliche Epitope erhalten bleiben und somit alle Antikörper-Bindungsstellen verfügbar sind. Dies führt dazu, dass Aicone-Protein Array Arrays eine sehr hohe Spezifität und damit ein hohes Signal-Rausch-Verhältnis aufweisen.
Hohe Reproduzierbarkeit
Auf Aicone-Protein Array basierende Protein-Arrays verwenden mehrere Positiv- und Negativkontrollen, um die Reproduzierbarkeit innerhalb und zwischen Studien und Chargen zu messen.
Die Grafik zeigt eine nahezu perfekte Pearson-Korrelation von über 0,97 beim Vergleich der Autoantikörperspiegel über 6.524 Proteindatenpunkte in zwei verschiedenen Chargen.
Picomolare Empfindlichkeit
Autoantikörper auf Aicone-Protein Array basierten Proteinarrays können mit sehr hoher Empfindlichkeit nachgewiesen werden, es werden nur 1 – 10 µl Serum benötigt. Die Nachweisgrenze liegt im Bereich von 10 pg/ml, mit einem linearen dynamischen Bereich von mindestens 5 Größenordnungen.